Ann. For. Sci. 51 (1994) 175-182
DOI: 10.1051/forest:19940207

Micropropagation of the pine hybrid Pinus brutia (Ten) × Pinus halepensis (Mill) by culturing fascicle shoots

A Scaltsoyiannes^a, K Panetsos^a, A Economou^b and P Tsoulpha<sup>a

a</sup>  Laboratory of Forest Genetics, Department of Forestry and Natural Environment, Aristotelian University of Thessaloniki
^b  Laboratory of Floriculture, Department of Agriculture, Aristotelian University of Thessaloniki, 54006 Greece

Abstract - Fascicle shoots proved to be an ideal plant material for micropropagation of the pine hybrid P brutia (Ten) x P halepensis (Mill). This could be possibly attributed to their morphological and physiological state. Induced fascicle shoots of 4-yr-old seedlings were used as explants. Their induction was achieved by spraying once with the new herbicide Arsenal (1 000 mg I^-1). First, explants were elongated in vitro on LP medium and then transferred to the multiplication stage. Multiplication was accomplished by decapitating, quick-dipping in 0.22 mM BA and inoculating the explants on BIMI medium. On the induced first-generation shoots the same procedure was applied, in order to obtain second-generation shoots and then these were proceeded to the rooting and acclimatization stages. In particular, when microcuttings were pretreated with 2.46 μM IBA + 2.7 μM NAA + 0.65% agar w/v + 1.5% sucrose w/v for 7 d and then transferred to greenhouse conditions, a good root system was developed within an 8-12-week period. A large variation in rootability was noted between clones. The above method may be proved to be efficient for clones that exhibit high rooting ability.

Résumé - Micropropagation de l'hybride du pin P brutia (Ten) x P halepensis (Mill) au moyen de culture des pousses fasciculaires. Les pousses fasciculaires constituent un matériel végétal idéal pour la micropropagation de l'hybride artificiel du pin Pinus brutia (Ten) x Pinus halepensis (Mill). Ceci peut être attribué à leur état morphologique et physiologique. Des pousses fasciculaires induites à partir de plants âgés de 4 ans sont utilisées comme explants. Leur induction est réalisée par une seule pulvérisation avec le nouvel herbicide Arsenal (1 000 mg•l^-1) (figs 1, 2). Au début, les explants sont allongés in vitro dans le milieu LP puis ils sont transférés pour l'étape de multiplication. Celle-ci résulte de la décapitation, puis l'immersion rapide dans une solution 0,22 mM BA et le repiquage de l'explant dans le milieu BIMI (fig 3, tableau I). Sur pousses induites de la première génération, on applique la même procédure afin d'obtenir des pousses de deuxième génération. Quand ces pousses ont 3-4 cm de haut (fig 4), elles sont soumises aux étapes d'enracinement et d'acclimatation (figs 5, 6). En particulier, quand les microboutures sont prétraitées dans un milieu contenant 2,46 μM IBA + 2,7 μM NAA + 0,65% agar w/v + 1,5% saccharose w/v pendant 7 j et puis transférées en serre, un bon système racinaire se développe en 8-12 sem (tableau II). On note une grande variation du pourcentage d'enracinement entre clones (tableau III). La méthode ci-dessus peut être efficace pour les clones qui présentent une capacité d'enracinement élevée.

Key words: P brutia (Ten) × P halepensis (Mill) / induction of fascicle shoots / micropropagation / clonal variation

Mots clés : Pinus brutia (Ten) × Pinus halepensis (Mill) / pousses fasciculaires / micropropagation / variation clonale