Ann. For. Sci. 63 (2006) 879-885
DOI: 10.1051/forest:2006071

An improved micropropagation protocol for stone pine (Pinus pinea L.)

Pablo Alonso^a, Paloma Moncaleán^b, Belén Fernández^a, Ana Rodríguez^a, Maria Luz Centeno^c and Ricardo J. Ordás<sup>a

a</sup>  Área de Fisiología Vegetal, Instituto Universitario de Biotecnología, Departamento de Biología de Organismos y Sistemas, Universidad de Oviedo, C/ Catedrático Rodrigo Uría s/n, 330071 Oviedo, Spain
^b  Current adress: Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agrario, Centro Arkaute, Aptdo. 46, 01080 Vitoria-Gasteiz, País Vasco, Spain
^c  Departamento de Biología Vegetal, Universidad de León, Facultad de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus de Vegazana, León, Spain

(Received 9 November 2005; accepted 30 May 2006; published online 9 December 2006)

Abstract - A protocol for micropropagation from isolated cotyledons from Pinus pinea L. has been developed. Major improvements are the increase in rooting rates and the description for the first time of a successful continuous multiplication procedure. For bud induction, isolated cotyledons were cultured on 1/2 LP with 44.4 M BA during 4 days. Shoot development was obtained by transfer to 1/2 LP hormone-free medium with activated charcoal. Since an additional 20 weeks were required for shoot elongation and rooting, at least 70 plantlets can be expected per seed after 29 weeks based on a 70% success rate. Besides, shoots can be micropropagated successively by subculturing on 1/2 LPC.

Résumé - Amélioration du protocole de multiplication par micropropagation du pin pignon (Pinus pinea L.). Nous avons développé un protocole de multiplication par micropropagation de Pinus pinea L. à partir de cotylédons isolés. Les principaux progrès réalisés concernent l'augmentation du taux d'enracinement et la description pour la première fois d'une méthode de multiplication en continu. Pour l'induction des bourgeons, des cotylédons isolés ont été cultivés dans le milieu 1/2 LP avec 44.4 M BA pendant 4 jours. Le développement des pousses a été obtenu en transférant les bourgeons dans un milieu 1/2 LP sans hormone avec du charbon actif. Compte tenu des délais nécessaires (20 semaines) pour obtenir l'élongation des pousses et l'enracinement, au moins 70 plantules par graine peuvent être obtenues au bout de 29 semaines, sur base d'un taux d'enracinement de 70 %. De plus, les pousses peuvent être multipliées avec succès par micropropagation par sous-culture dans le milieu 1/2 LPC.

Key words: conifers / micropropagation / organogenesis / rooting / tissue culture

Mots clés : conifère / micropropagation / organogenèse / enracinement / culture de tissus

Corresponding author: rordas@uniovi.es

© INRA, EDP Sciences 2006