In vitro micropropagation of a tree legume adapted to arid lands Acacia tortilis subsp raddiana

Abstract - A procedure is described for micropropagation of Acacia tortilis subsp raddiana (Forsk) Hayne (Mimosoideae) using embryonic explants. Shoot bud formation from cotyledonary nodes was observed on Murashige and Skoog (MS) medium containing various doses of cytokinins (2.5-5.0 mg/l) viz 6-benzyl adenine (BA) and kinetin, with or without incorporation of auxin (0.1-0.25 mg/l) viz 1-naphthalene acetic acid (NAA) and indole acetic acid (IAA). Multiple shoot regeneration (13-15) was achieved on MS medium supplemented with NAA (0.1 mg/l) and BA (5.0 mg/l). Incorporation of auxin, eg, IAA and NAA promoted callusing in the explants. Shoot bud formation was restricted to the cotyledonary node and proximal region of the cotyledons. Scanning electron microscopy showed that shoot bud induction was visible after 5 d of culture. No regeneration of shoot buds from the hypocotyl explants was observed with any treatment used. Half-strength MS medium containing indole butyric acid (3.0 mg/l) was found suitable for rooting in regenerated shoots. In vitro developed plantlets were transferred into soil.

Résumé - Micropropagation in vitro d'une Légumineuse de zone aride : Acacia tortilis subsp raddiana. Une méthode a été développée pour la multiplication de pousses et la formation de plants in vitro à partir d'explants d'embryons d'Acacia tortilis (Forsk) Hayne, ssp raddiana (Mimosoïdées). Cette Légumineuse est un arbre important adapté aux conditions arides, élevé en particulier pour la stabilisation des dunes et les programmes de reboisement dans différentes zones arides du monde. Les graines d'A tortilis, récoltées sur des génotypes sélectionnés par le CAZRI, ont été mises à germerin vitro sur un milieu de Murashige et Skoog (MS), sans régulateurs de croissance. Différents types d'explants (hypocotyles, cotylédons, axes embryonnaires [= noeuds cotylédonaires]) ont été excisés à partir de semis d'une semaine. Différents régulateurs de croissance ont été incorporés au milieu MS pour les études de régénération. L'induction de pousses à partir d'explants de noeuds cotylédonaires a été observée dès le 5^e j de culture, comme en témoignent les observations faites en microscopie électronique à balayage. La régénération de pousses est favorisée par l'addition dans le milieu de concentrations élevées de cytokinines (2,5 à 5 mg.l^-1) avec ou sans auxine (0,1 à 0,25 mg.l^-1) (tableau I). Jusqu'à 13 pousses peuvent se différencier à partir d'explants élevés sur milieu de MS additionné d'ANA (0,1 mg.l^-1) et de BA (5 mg.l^-1). La croissance et la multiplication des pousses est stimulée par des repiquages à 4 sem d'intervalle. Sur les explants se forment à la fois des pousses axillaires et des pousses adventives. Il n'y a en revanche eu aucune régénération à partir d'hypocotyles ou de cotylédons, et cela quels que soient les traitements. Des pousses feuillées, bien allongées, ont été obtenues à partir du milieu de multiplication après 10 à 12 sem de culture. Elles se sont enracinées (tableau II) sur milieu MS à la dilution 1/2 contenant de l'AIB (3 mg.l^-1). L'ANA s'est avéré moins efficace que l'AIB pour l'enracinement. L'adjonction de concentrations d'auxine plus élevées (> 3 mg.l^-1) favorise la formation de cals à la base des pousses. Des plantules développées in vitro ont avec succès été élevées pendant 2 mois en conditions non stériles. Le système de régénération ainsi obtenu peut être utile pour la multiplication en masse d'A tortilis.